Пцр в диагностике туберкулеза

Анализ крови ПЦР-методикой: диагностика на туберкулез

ПЦР в диагностике туберкулеза

Анализ крови по ПЦР-методике на туберкулез — современная диагностика выявления абсолютно всех штаммов инфекционного заболевания и их очагов в биоматериале организма человека.

Анализ крови и мочи методикой ПЦР на туберкулез – является фактически обязательным исследованием скрытого проистекания заболевания, передающегося не только воздушно-капельным путем, но и посредством контакта с насекомыми.

Туберкулез представляет собой достаточно специфическое инфекционное заболевание, очаг которого в тканях любого человека может находиться на протяжении многих лет, а выход распространения найти в течение нескольких недель.

Именно потому сдавать анализы крови либо мочи на выявление туберкулеза стоит наряду с основными исследованиями.

Современный метод постановки диагноза: ПЦР-диагностика

Подобрать оптимальные варианты лечения туберкулеза довольно сложно. Основная причина затруднительного излечивания состоит в поздних сроках обнаружения инфекционного заражения.

Диагностика ПЦР методикой представляет собой современный способ выявления очагов микобактерий в мизерном составе, когда сама болезнь еще не подала признаки присутствия.

То есть до первых симптомов проявления туберкулеза, а особо до достижения состояния переносчика, допустимо диагностировать и излечить инфекцию.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) методика исследования лабораторным способом определения ДНК микобактерий, основанная на генетик-биологическом материале. В основе действия стоит особый фермент – полимераза, отвечающая за синтез молекул ДНК.

Применение полимеразы в исследовательских целях на небольших фрагментах биологического материала, выявляет ДНК бактерий существующих в минимальных количествах. Размножение ДНК молекул дает необходимый объем материала для исследований и определения типа бактерий, и ее функциональную принадлежность к определенному штамму туберкулеза.

Диагностика туберкулеза посредством полимеразной цепной реакции выдает фактически 100% результаты, что относит методику к наиболее достоверным способам выявления заболеваний бактериального и инфекционного типа. Не исключено, что в будущем пробу Манту и другие методы диагностирования для определения микобактерии туберкулеза, полностью сменит ПЦР-методика.

Примечательно, что анализ ПЦР является достаточно специфичным. Поясняется фактор тем, что при исследовании биологического материала на признак туберкулеза, диагностика вполне может выявить и другие типы инфекций, либо опровергает наличие таковых в легких.

Необходимость в диагностике методом ПЦР

Симптоматика проистекания такого заболевания, как туберкулез, весьма спорна. Например, у детей болезнь протекает без особых явных симптомов, как и в случае заражением иного рода бактериальной инфекцией. По сути, треть всего населения проживающего на планете заражены туберкулезом и являются носителями инфекции.

Существует несколько форм заболеваний:

первичная — является ранней стадией;
латентная – скрытая форма болезни, не является заразной;
активная – заразная открытая форма заболевания;
вторичная – имеет свойство распространяться через кровь по всему организму.

Специалисты не дают направление на ПЦР на туберкулез абсолютно всем пациентам, что проходят обследования. Причина тому дороговизна оборудования для поликлиник государственного значения, и высокая стоимость анализа в частных лабораториях.

При условии, что выявлены симптомы:

продуктивного кашля, особо сильно проявляющегося в утреннее время;
выделения мокроты во время кашля зеленоватого либо желтоватого оттенка;
в процессе прогрессирования туберкулеза, в мокроте начинают появляться прожилки и сгустки крови.

Вышеперечисленные симптомы определенно указывают на присутствие в организме инфекции в открытой форме проистекания, которая требует незамедлительного лечения. Закрытая форма туберкулеза не имеет определенных симптомов на ранней стадии развития, тем не менее, существует ряд отличительных особенностей в самочувствии:

ночное отделение пота;
плохой аппетит;
общий упадок сил;
ощутимая потеря веса;
в целом ощущение слабости и недомогания.

До назначения ПЦР диагностики, специалист может дать направления на анализы привычных исследований заболевания, которые так же оправдывают себя при постановке диагноза:

осмотр и прослушивание пациента;
сбор анамнеза, опрос;
флюорография либо рентгенография;
лабораторные исследования — бактериологический посев мокроты, анализ мочи, микроскопия мазка, общий анализ венозной крови;
компьютерная диагностика.

ПЦР методика исследует инфекционные поражения туберкулезной палочкой легких фактически во всех биологических материалах человека.

Диагностика проводится фактически с фрагментами любого типа:

венозной кровью либо с пальца;
со сбором мочи;
с выделениями мочеполовой системы;
калом;
мокротами;
соскобами с любых органов;
спинномозговой жидкостью;
околоплодными водами при беременности.

На диагностирование методикой полимеразной цепной реакцией может направить специализированный медик с таких сфер, как терапевт, фтизиатр, педиатр, пульмонолог, венеролог, гинеколог, и прочие.

Источник: http://testanaliz.ru/pcr-na-tuberkulez

Пцр на туберкулез — диагностика и анализ крови на туберкулез, советы врачей

Анализ ПЦР на туберкулез является самым популярным среди медицинских исследований в области данного заболевания.

Симптомы туберкулеза и его профилактика

Самый высокий процент заболевания развит в малоразвитых странах. Это чаще всего происходит в результате пониженного иммунитета у человека.

Заболевание является одним из самых старых. Эта болезнь может находиться в оболочки мозга, в пищевом тракте, на суставах и позвоночнике, в мочевыделительной системе и небольшими участками на коже человека.

Специалисты легче всего определяют пораженную болезнью кожу. На участке возникают небольшие уплотнения, которые со временем увеличиваются в размере, прорываются наружу вместе с беловатой жидкостью.

Возбудитель туберкулеза чаще всего можно подцепить при разговоре с больным человеком, при его кашле или чихании. Обычно заболевание протекает без симптомов или имеет открытую форму, но ПЦР диагностика туберкулеза дает возможность выявить его на ранних этапах и в экстренных случаях.

Симптомы заболевания: продолжительный мокрый кашель, лихорадка, озноб, обильное потоотделение по ночам, резкая потеря в весе, чувство усталости и слабости.

Открытая форма заболевания является самой опасной. Человек, болеющий туберкулезом способен заразить здоровых людей.

В некоторых ситуациях это может перейти в кровотечение легких человека. Это очень опасно и требует срочное медицинское вмешательство.

Для профилактики и распознавания туберкулеза специалисты назначают: пробу – тест туберкулина, экспертизу биологического материала, флюорографию, рентген и анализ крови, мокроты или слюны.

Диагностирование заболевания

Усовершенствованная диагностика заболевания – это правильное и во время начатое лечение. В большинстве случаев привычные методы обнаружения возбудителей болезни не всегда имеют эффект и к тому уже устарели.

Самым главным способом определения и диагностирования заболевания легких является медицинское исследование анализов. Обычно пользуются диагностикой ПЦР. Данное обследование было открыто совсем недавно, в 1983 году американским биохимиком Муллисом.

Тест у больного при туберкулезе легких выполняют исключительно в особых случаях, когда тяжело установить диагноз или невозможно провести инструментальным способом обнаружение заболевания.

Полимеразная цепная реакция является надежным методом ПЦР. Данный анализ дает возможность определить возбудителя, сколько его находиться в крови, моче и жидкости спинного мозга. Такое медицинское обследование является самым безопасным.

Он имеет высокую чувствительность, что помогает распознать заболевание впервые часы после заражения, до того, как появятся симптомы болезни. Такой способ анализа дает результат уже через несколько часов, после сдачи биологического материала. Посев этого анализа выполняют три раза, но аспирацию больного желудка проводят только в больнице.

Для определения результатов разработано три критерия: высокая точность, чувствительность до 90%, специфичность.

Тест на ПЦР применяют в некоторых случаях:

для диагностирования туберкулеза в легких;
определения источника заболевания;
определение внелегочной локализации;
диагностирование рецидивов.

Оценить результат, и назначит правильное медицинское лечение, может только специалист. Очень важно, для назначения правильной схемы медицинского лечения при обнаружении туберкулеза, нужно провести тест на чувствительность возбудителя к противотуберкулезным аппаратам.

Разновидность медицинских анализов на туберкулез

Сдать необходимый анализ можно двумя способами: взять кровь или слюну у человека или произвести забор мокроты.

Анализ крови методом ПЦР может быть двух видов: ИФА и ПЦР. Такое исследование помогает следить за эффективностью медицинского лечения.

Иммуноферментный анализ крови помогает найти в организме человека антитела противостоящие микробам туберкулеза. Такое исследование проводиться один раз в течение суток. Главный минус – это его низкая чувствительность, что позволяет определить только заболевание с низким уровнем зараженностью.

Самым популярным и эффективным исследованием является анализ на микобактерии туберкулеза. С помощью нее врачи легко могут найти ДНК бактерий в крови человека. Такой метод используют так же и для определения количества бактерий, для контроля над лечением пациента, для выявления раннего рецидива.

ПЦР слюны является одним из самых современных способов исследования. Такой анализ поможет выявить в слюне инфекционные бактерии. С помощью ПЦР увеличивают число фрагментов ДНК вредных микробов.

Культуральный метод предназначен для обследования мокроты человека, для обнаружения микробактерий.

Подготовка к сдаче анализов на ПЦР

Внимание, нужна правильная подготовка слюны к ПЦР. Если не соблюдать все предписания, то анализ может быть ложноположительным.

Перед сдачей анализа за 12 часов запрещается курить, принимать пищу и лекарства, а так же употреблять алкоголь. Запрещено чистить зубы, нельзя пользоваться ополаскивателем, освежителем для рта и зубной нитью.

Запрещено пользоваться губной помадой и вступать в интимные отношения. Разрешено ополаскивать рот простой кипяченой водой;

Данное обследование поможет выявить: герпес, хламидии, туберкулез, возбудители пневмонии, онковирусы, бароллеоз, мононуклеоз, ВИЧ, гепатит всех видов, краснуху.

Анализ на микобактерии в основном проводят в спорных случаях, а именно если тяжело поставить диагноз или был контакт с больным туберкулеза, перед началом операции, для обнаружения заболевания. Используют для обследования беременной женщине, так как такой метод самый безопасный для матери и плода.

Иногда анализ выполняют в частной клинике, так как пациент не придерживался правил для сдачи анализа, но при этом его беспокоят все симптомы. Анализ могут выполнить, когда специалисты не уверены после проведения пробы Манту или пациентом является ребенок.

Преимущества и недостатки медицинских анализов для определения туберкулеза

ПЦР является самым востребованным и эффективным способом определения заболевания.

Плюсом этого медицинского обследования является то, что его можно проводить для урологических, гинекологических, онкологических, инфекционных, гематологических, пульмонологических, гастроэнтерологических и других исследований.

Главным преимуществом такого медицинского исследования является, что анализ крови, мокроты и слюны готовы в короткие сроки (для выявления заболевания потребуется от 5 часов). Такое медицинское обследование позволяет провести анализы, когда под запретом или недоступные некоторые способы изучения болезни. Отлично подходит для выявления рецидива у человека

Благодаря такому анализу появилась возможность проведения исследований для любой биологической среды. Он разрешен для взятия материала у детей. ПЦР дает возможность выявить возбудителя на любом этапе заболевания. Благодаря его высокой чувствительности, можно найти микробы даже если присутствует всего несколько бактерий.

Метод ПЦР расширяет свои возможности. Его так же используют для определения отцовства, для изготовления новых генов, мутаций, для скрещивания элементов ДНК и так далее.

После медицинского лечения анализ крови может показать присутствие живых или мертвых возбудителей в небольших количествах, после проведения медицинского обследования, он даст положительный результат.

Бактерии и микробы могут подвергнуться мутации, после чего ПЦР не сможет их определить и выявить, поэтому только специалист может назначить исследование необходимой среды, иначе такое медицинское обследование будет безрезультатным.

После сдачи анализов бывает отрицательный результат, но это никак не исключает возможность человека быть зараженным туберкулезом. Такое медицинское обследование проводят для больных с тяжелой стадией заболевания легких, когда любые другие исследования не дают точных результатов. ПЦР будет полезна для людей с легочным и внелегочным туберкулезом.

К сожалению, медицинское оборудование для выявления возбудителей туберкулеза очень дорого стоит.

Государственные больницы и поликлиники не могут его себе этого позволить, но платные клиники принимают анализы пациентов и в короткие сроки предоставляют готовый результат.

Источник: https://MedTub.ru/mantu/analogi/ptsr-na-tuberkulez

Пцр на туберкулез: анализ крови вместо манту, информативен ли он

Туберкулез или чахотка – одно из наиболее популярных инфекционных заболеваний 21 века. Возбудителями его являются специальные микробактерии – палочки Коха.

Распространяется заболевание не только на легкие, но головной мозг, пищеварение, суставы или позвоночник, мочеполовую систему, кожный покров.

Особенно печальная ситуация на территории стран СНГ, здесь периодически случаются туберкулезные эпидемии. Россия, Казахстан, Украина возглавляют печальный рейтинг по распространению данной заразы.

Инфекция легко передается воздушно-капельным путем или через пищеварительную систему, поражает жизненно-важные органы, а также способна быстро приспосабливаться к полимерным лекарствам и химиотерапии.

Одним из главных факторов успешного излечения при туберкулезе является своевременное обнаружение инфекции.

Методы диагностики

Человечество придумало множество методов распознания опасной болезни. Диагностика туберкулеза разделяется на инструментальную и лабораторную.

В первом случае производится анализ крови на туберкулез, а также мокроты, мочи.

Вторая группа представляет собой исследование при помощи рентгена и эндоскопии. Инструментальные методы диагностики туберкулеза в свою очередь бывают лучевыми и хирургическими.

Виды лучевых способов нахождения болезни

Флюорография — способ диагностирования заболевания, знакомый каждому жителю СНГ. При помощи рентгеновых лучей исследуются легкие и внутригрудные лимфатические узлы.
Рентгенография грудной клетки – похожий на флюорографию, но более качественный метод обнаружения инфекции. Снимок получается подробнее и в двух проекциях, но эта процедура примерно в шесть раз дороже. Обычно ей пользуются после того, как возникли серьезные подозрения на заболевание.
Компьютерная томография осуществляется как дополнительная диагностика, применяемая также после серьезных оснований на наличие инфекции.

К хирургическим способам диагностирования относят эндоскопию бронхов, а также медиастиноскопию и торакокоскопию.

Первый метод заключается в исследовании бронхиального дерева легких при помощи «зонда» в этот орган. Остальные два способа дают возможность изучить плевральную часть легкого при помощи прокола грудной клетки.

К лабораторным исследованиям относят:

Анализ мокроты на туберкулезную палочку.
Микроскопические исследования.
ПЦР диагностика туберкулеза

Что представляет собой ПЦР диагностика?

Одним из наиболее совершенных способов лабораторной диагностики инфекций специалисты называют полимеразную цепную реакцию.

Этот метод разработал знаменитый ученый из США Кэрри Муллис в 1983 году, за что получил Нобелевскую премию.

ПЦР анализ представляет собой выделение частиц ДНК из образцов мокроты, крови, спинномозговой жидкости, кала и т.д. для последующего их биосинтеза.

При помощи сложного молекулярно-генетического исследования определяется природа микробов, находящихся в теле пациента.

Проводится такого рода анализ на туберкулез в несколько этапов:

Вначале берутся биологические образцы. Материалы помещаются в специальные контейнеры и направляются в лабораторию.
В центре для исследований анализы нагревают до 97 градусов. Это дает возможность разрушить структуру генома ДНК микроорганизмов, который состоит из нескольких цепочек.
Температура специально понижается для того, чтобы праймеры (участники ДНК, с которых начинается процесс биосинтеза) могли соединиться с какой-нибудь цепью дезоксирибонуклеиновой кислоты.
После этого осуществляется биосинтез необходимых для обнаружения молекул.

После 25-30 повторенных циклов в процессе лабораторных исследований врачи имеют возможность распознать, имеются в теле пациенте или нет инфекционные микроорганизмы.

Преимущества и недостатки

ПЦР на туберкулез является самой современной диагностической методикой. Способ дает возможность обнаружить инфекцию на любой стадии с высокой достоверностью. Преимущества:

Скорость – на исследование уходит не более пяти часов. О результатах проверки на микробактерии туберкулеза можно узнать в течение суток.
Безопасность – метод ПЦР не имеет возрастных противопоказаний.
Своевременность — данная методика позволяет обнаружить туберкулез на тех стадиях, когда болезнь не имеет симптомов.
Высокая степень точности – если в анализах находится всего несколько микроорганизмов, они будут найдены при помощи полимеразной цепной реакции. Также такая методика дает возможность легко определить возбудитель туберкулеза.
Универсальность — диагностика используется не только для обнаружения чахотки, но и других болезней, таких как хламидиоз, гонорея и т.д.

Недостатками данного метода являются:

Высокая стоимость обследования.
Метод не годится для тех, кто прошел курс терапии, так как наличие мертвых бактерий Коха может привести к ложноположительному результату.
В случае мутации инфекционных микроорганизмов их геном можно не распознать, сделав ложный вывод.
Важно правильно подобрать среду обнаружения. К примеру, результат анализа крови пцр на туберкулез(разбавочное вхождение) будет отрицательным, если инфицирована нервная система.
Не всегда получится применить этот метод к пациентам, у которых диагностировано поражение легких.

Кроме этого, для такого анализа на туберкулез необходимо современное оборудование, которым не обладает 90 процентов больниц. В СНГ такой анализ может осуществить сеть клиник Инвитро.

Правила сдачи анализа

Рекомендации к пациентам, проходящим такой тест на туберкулез, различаются в зависимости от типа анализа, который они сдают.

При приеме крови на ПЦР необходимо за час до процедуры воздержаться от курения, за два – исключить прием алкогольных напитков и жирной еды.

Рекомендуют также воздержаться от физических нагрузок, нельзя также делать забор крови на туберкулез натощак.

При сдаче мазка из ротовой и носовой полости нельзя принимать пищу 2-4 часа до процедуры, иначе он не будет информативен. Также не следует употреблять алкоголь.

Для точных показаний анализа запрещено курить ранее, чем за час до процедуры. Накануне воздержитесь от чистки зубов и использования спреев и аэрозолей для рта.

При подозрении на туберкулез мочеполовой системы пациент за 2-3 дня до сдачи должен исключить секс, за 2-3 часа до процедуры не ходить в туалет «по-маленькому». Половые органы необходимо мыть обычной водой без специальных средств.

Женщинам советуют не использовать вагинальные таблетки, свечи, шарики, а также воздержаться от анализов в критические дни.

За 5 дней до сдачи результат необходимо отказаться от процедуры кольпоскопии, а также трансвагинального УЗИ,

В каких случаях используется ПЦР диагностика?

Такую сложную диагностику имеет возможность провести далеко не каждая клиника, но все чаще врачи прибегают к таким способам исследования. Обычно такого рода анализы проводятся в особых ситуациях.

Например:

В случае сомнительных результатов манту может применяться анализ крови на туберкулез.
В случаях, когда пациент контактировал с инфицированным, но лечащий врач не может точно определить диагноз.
При срочной операции, когда необходимо в сжатые сроки выяснить, имеется ли у больного данная инфекция.
При беременности у пациентки, когда другие способы исследования не являются достаточно безопасными для новорожденного ребенка.

Стоит отметить, что данная диагностика из-за своей безвредности рекомендуется детям.

Если у школьника имеются противопоказания против туберкулиновой пробы, он может сдать анализ крови на туберкулез вместо манту методом ПЦР.

Источник: https://tuberkulezkin.ru/analizy/pcr-na-tuberkulez.html

Пцр на туберкулез: диагностика туберкулеза, анализ крови, тест на микобактерии

Несмотря на колоссальные достижения в области медицины, человечество до сих пор не может полностью взять под контроль такое опасное заболевание, как туберкулез. В борьбе с этой инфекцией усовершенствовались методы диагностики, вакцинация, способы лечения.

Но туберкулез по-прежнему нередко приводит к смертельному исходу. Уберечься от страшной инфекции можно, если вести здоровый образ жизни, проводить плановую вакцинацию и регулярное обследование. Полностью исцелиться в случае заражения поможет только ранняя диагностика.

Анализ крови ПЦР на туберкулез позволяет на самых ранних сроках выявить палочку Коха.

Туберкулез что за инфекция

Туберкулез (устаревшее название чахотка) ― это инфекционная патология, поражающая чаще всего органы дыхания.

Микобактерии туберкулеза распространяются воздушно-капельным путем при чихании и кашле зараженного человека или животного. Опасность для инфицирования также представляет слюнная жидкость больного туберкулезом.

После попадания в организм часто наличие инфекции никак не проявляется, то есть заболевание протекает в скрытой форме.

В зависимости от течения болезни выделяют две формы туберкулезной инфекции:

Закрытую стадию туберкулеза фтизиатры относят к малоопасной либо вообще неопасной, с точки зрения заражения окружающих. Микобактерии при скрытой форме в мокроте не выявляются доступными диагностическими методами, в том числе и посредством анализа ПЦР. Опасно это состояние тем, что в одном из десяти случаев оно может переходить в активную стадию, то есть в открытую форму туберкулеза.
Открытую стадию туберкулезного инфицирования характеризует обнаружение в мокроте и в иных биологических жидкостях организма палочек Коха. При такой форме заболевания пациент крайне опасен для окружающих его людей даже при соблюдении норм гигиены.

К востребованным диагностическим мероприятиям по обнаружению туберкулезных микобактерий относятся флюорография, томография и рентгенография грудной клетки и иных пораженных органов.

С успехом проводятся исследования разного биологического материала, а также кожная туберкулиновая проба она же реакция Манту.

Но наиболее эффективен молекулярно-генетический анализ полимеразной цепной реакции, сокращенно именуемый ПЦР.

Что представляет из себя исследование ПЦР на туберкулезную инфекцию

Полимеразная цепная реакция ― это точнейшая молекулярно-генетическая диагностика. Анализ ПЦР при туберкулезном инфицировании позволяет с большой достоверностью выявить присутствие ДНК или РНК возбудителя в изучаемой пробе крови или иных биологических жидкостях организма.

Другие преимущества при ПЦР диагностике туберкулеза:

Безупречная точность полимеразной цепной реакции при анализе на туберкулезное заражение достигается за счет особенного фрагмента, относящегося к конкретному возбудителю, в данном случае микобактериям туберкулеза.
Гарантия стопроцентного результата благодаря чувствительности анализа ПЦР, которая составляет от десяти до тысячи клеток в исследуемом образце, в биологическом материале реально выявить даже единственную клетку туберкулезной микобактерии.
Самое срочное получение результатов обследования всего лишь в течение 3,5–5,5 часов с момента сдачи анализа ПЦР на микобактерии туберкулеза.

Анализ ПЦР при туберкулезе несомненный прорыв в области постановки ранних и точных диагнозов.

С момента появления молекулярно-генетического метода диагностики стало возможным обнаружить туберкулез и другие смертельно опасные инфекции на самой ранней стадии, спустя дни или максимум несколько недель после заражения.

Когда возбудители только начинают атаку на организм, их еще можно уничтожить без последствий для органов и систем тела человека.

Микобактерии туберкулеза обладают характерной особенностью, значительно усложняющей излечение этого заболевания, ― способность приспосабливаться к медикаментозному воздействию некоторыми препаратами.

Анализ ПЦР при туберкулезе дает возможность выяснить восприимчивость микобактерий туберкулеза к назначенному препарату и тем самым установить эффективность терапии.

При проведении исследования ПЦР с целью определения устойчивости микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам используют способность генов возбудителя «запоминать» невосприимчивость к конкретному препарату. Результат исследования генов на устойчивость к лекарствам можно получить уже через два дня после сдачи анализа ПЦР.

Как выполняется метод ПЦР при туберкулезе

Сущность диагностики путем полимеразной цепной реакции состоит в выделении из биологических жидкостей пациента часиц ДНК возбудителя и последующей классификации его по типу микроорганизма.

Для обнаружения возбудителя достаточно даже самого микроскопического его фрагмента цепочки ДНК.

К длинному списку достоинств анализа на туберкулез посредством ПЦР можно добавить и абсолютную простоту данного исследования.

Этапы диагностики туберкулеза при помощи полимеразной цепной реакции:

В качестве исследуемых образцов используют кровь, мокроту, промывные жидкости бронхов.
Далее, биологический материал в течение нескольких минут подвергают воздействию высоких температур, доходящих до 97 градусов по Цельсию. За счет чего происходит разрушение (денатурация) первоначальной структуры ДНК возбудителя, состоящей из пары цепей.
Следующей операцией является отжиг, при котором температура снижается, чтобы дать праймеру соединиться с одной из разъединенных во время предыдущей процедуры цепей ДНК.
Завершающим этапом выступает элонгация, во время которой осуществляется биологический синтез необходимых молекул.

Понадобится около 25–30 циклов, чтобы получить требующееся количество копий ДНК возбудителя, которые уже можно классифицировать в зависимости от принадлежности к определенному штамму. Для выполнения исследования посредством полимеразной цепной реакции требуется специальное дорогостоящее оборудование. Установка подобных приспособлений не везде возможна.

Поэтому анализы ПЦР при подозрении на туберкулез нельзя назвать самыми доступными по финансам.

Но в некоторых обстоятельствах, когда дорога каждая минута, в силу возраста или каких-то особенностей организма противопоказаны иные методы диагностики, ПЦР анализу нет равных, так как он абсолютно безопасен.

Диагностика ПЦР при туберкулезной патологии назначается в случае спорной ситуации, если отсутствует яркая клиническая картина, а другие способы исследования показывают противоречивые результаты.

Помимо отсутствия или наличия штамма конкретной микобактерии туберкулеза. При помощи полимеразной цепной реакции существует возможность определить на какой стадии находится заболевание.

Но необходимо учитывать, что если анализ ПЦР будет проводиться у лиц, прошедших курс терапии от туберкулезного поражения.

Тогда в крови и иных исследуемых образцах может оставаться незначительное количество погибших или еще на стадии умерщвления микобактерий туберкулеза и ответ может быть ложноположительным.

Анализ ПЦР на выявление туберкулезного инфицирования ― это частичное решение проблемы, в дополнение к массовой вакцинации, в борьбе со смертельными исходами в случае заболевания туберкулезом.

Теперь не нужно ждать обнаружения красноречивых симптомов или появления характерных для туберкулеза очагов на снимке после флюорографии.

При любом подозрении на возможное инфицирование дабы полностью исключить страшные последствия всегда есть возможность провести анализ на ПЦР.

Источник: https://krov.expert/analiz/ptsr-na-tuberkulez.html

Пцр для диагностики туберкулеза

06.09.2017

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — современный диагностический способ исследования инфекционных заболеваний методами генной инженерии. Она разработана американским биохимиком Кэри Бэнкс Муллис в 1983 году. При туберкулезе анализ ПЦР дает ответ о наличии возбудителя в крови пациента за несколько часов, имея малое количество материала.

Суть метода

Основа метода заключается в том, что во время анализа, используя полимеразную цепную реакцию, из биологического материала больного выделяют частицы ДНК возбудителя, классифицируя его затем по виду микроорганизмов.

Биологическим материалом могут быть:

кровь;
экскременты в виде мочи, кала;
мокрота;
ликвор и другое.

Также возможно оценить стадию заболевания, определить восприимчивость возбудителя к тому или иному медицинскому препарату и назначить эффективное лечение.

Альтернатива Манту

В Российской Федерации при массовой проверки детских коллективов на микобактерии туберкулеза делают пробы Манту. К сожалению, она имеет ряд недостатков:

может дать положительную реакцию не только у больных, но и привитых детей;
спровоцировать приступ аллергической реакции.

Поэтому встала необходимость проводить другие анализы на туберкулез, особенно детям, вместо Манту. Сейчас, с 2009 года, диагностика туберкулеза у детей и взрослых насчитывает несколько современных способов, один из них — тест ПЦР.

Достоинства

ПЦР диагностика туберкулеза имеет ряд достоинств:

Биологическая проба определяет от десяти до ста клеток, достоверность сто процентная;
Исследование длится не более пяти часов;
Возможность выявления туберкулеза легких, в то время, как другие методы не всегда эффективны;
Возможность выявления фрагмента, соответствующего конкретному возбудителю.

Назначение

Направление на этот анализ могут дать следующие врачи: пульмонологи, фтизиатры, терапевты, у детей — педиатры. Показания к диагностике:

присутствует основная симптоматика туберкулеза;
длительно протекающее заболевание дыхательных путей;
присутствует контакт с туберкулезными больными;
при возникновении сомнения у врача после снимка рентгена.

Подготовка

За три дня до того, как сделать ПЦР анализ, для достоверности полученных данных пациент не должен курить, употреблять алкоголь и лекарственные средства. Если материалом для пробы является мокрота, не рекомендуется чистить зубы, особенно зубными пастами, которые содержат бактерицидные вещества.

Разрешается полоскание рта чистой водой. За день до процедуры необходимо исключить из рациона жирные продукты, а также продукты, вызывающие аллергию.

Забор материала осуществляется утром натощак, спустя четыре-пять часов после последнего приема пищи.

Этапы проведения

ПЦР на туберкулез основан на методе термоциклирования и включает в себя следующие этапы:

Забор биологического материала: крови, мокроты, промывной жидкости бронхов и т.п.
Для разрушения первоначальных цепочек ДНК микобактерии, материал для анализа держат под воздействием высокой температуры на протяжении нескольких минут (денатурация).
Снижение температуры для того, чтобы праймеры ДНК соединились с отсоединенной в процессе денатурации цепи ДНК (отжиг).
Копирование целевых участков ДНК (элонгация).

Чтобы получить необходимое количество копий ДНК микобактерии, осуществляется двадцать пять- тридцать циклов.

Ошибки в результатах

Ложный результат может быть в том случае, если в период забора материала пациент принимал медикаменты, а также, если тест проводился у лиц, прошедших противотуберкулезное терапевтическое лечение.

Ошибки возможны вследствие:

Приема таких препаратов, как Гепарин, и других медикаментов локального действия, способных ингибировать полимеразную реакцию, делая её бессмысленной.
Приема антибиотиков, так как они снижают число бактерий, и обнаружить правильное количество ДНК микроорганизмов становится невозможно.
Неправильного хранения материала, когда емкость с собранной биологической жидкостью была не закрыта, и в нее из внешней среды попали чужеродные микроорганизмы.

Недостатки

На современном этапе в России этим диагнозом пользуются редко в силу ряда причин:

Высокая стоимость анализа, нет в наличии во многих поликлиниках;
При лечении метод может дать ошибочную информацию;
Не всегда возможно применение у пациентов с сильным легочным поражением, страдающих иммунодефицитом, а также при внелегочном поражении.

Поэтому, при подозрении на туберкулез более информативно будет провести комплексное обследование, включающее: диаскинтест, анализ крови на туберкулез, проба Манту, компьютерную томографию и другие методы.

Стоимость

Тест ПЦР является достаточно дорогостоящим, что делает его недоступным для большинства людей.

Однако при диагностике туберкулеза важность и эффективность данного метода превышает его затраты, поскольку раннее выявление данного заболевания будет способствовать благоприятному исходу, а также предупреждению развития осложнений. Цена на анализ сильно разнится. Стоимость находится в диапазоне от 350 до 2000 рублей.

Диагностика туберкулеза с помощью ПЦР Ссылка на основную публикацию

Источник: http://tbdoc.ru/analysis/pcr.html

Что такое ПЦР на туберкулёз и как делать тест?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на туберкулёз – это точный анализ, способный выявить палочку Коха за несколько часов. Диагностика основана на методах генной инженерии. Врачи выделяют клетку ДНК, при помощи генно-молекулярных тестов определяют тип возбудителей.

Преимущества метода

Преимущества исследования:

позволяет выявить возбудителя на ранних стадиях, без проявления видимых симптомов;
диагностика не имеет противопоказаний и разрешена детям;
исследование можно проводить при взятии минимального количества материала.
универсальность исследования биоматериалов;
исследование эффективно при определении рецидива болезни.

Недостатки метода

Наряду с достоинствами, у ПЦР исследования имеются и недостатки.

Основные из них:

Исследование не везде можно сдать. Поскольку оборудование для такой диагностики дорогостоящее, его устанавливают в платных лабораториях.
ПЦР на туберкулёз может дать положительный ответ, если обнаружит убитые микобактерии, к примеру, после проведённого лечения.
Мутации возбудителей болезни значительно снижают эффективность метода ПЦР, поскольку нити ДНК неспособны последовательно синтезироваться.
Необходимость тщательно выбирать биоматериал для анализа.

Показания для ПЦР диагностики

Направляют на обследование по следующим показаниям:

Если был хотя бы единичный контакт с больным туберкулёзом и выявить заболевание с помощью стандартных анализов сложно.
Бывают ситуации, когда нет возможности привести человека для рентгена или других исследований. В таких случаях гораздо проще доставить мокроту.
Анализ назначается накануне предстоящей операции, когда необходимо определить, болен человек или нет.
Если у пациента сомнительный результат реакции Манту.
Назначают беременным и детям, чтобы избежать облучения от рентгена.

Виды анализов ПЦР на туберкулёз

Выбор биоматериала для обследования на туберкулёз должен назначаться в индивидуальном порядке.

Для диагностики ПЦР на туберкулёз могут взять анализы:

крови;
слюны (мазок);
мокроты;
мочи.

Анализ крови

Особенности анализа крови на туберкулёз:

Проводят в тех случаях, когда другие диагностики не подходят или противопоказаны. Например, для постановки верного диагноза требуется делать не один рентген-снимок. Для организма излишнее облучение небезопасно, поэтому взять кровь у пациента гораздо проще.
Также врач может дать направление на кровь при получении спорных результатов после флюорографии.

Анализ слюны

Особенности:

Анализ слюны менее популярен и информативен, чем другие исследования, так как туберкулёз не поражает слюнные железы. Поэтому в большинстве случаев результат будет отрицательным.
Метод направлен на выявление лёгочных и внелёгочных форм.
Если под действием реагента цвет образца не меняется, это означает, что возбудителей нет. Если все же возникает подозрение на болезнь, то проводится дополнительный комплекс анализов.

Анализ мокроты

Анализ мокроты является наиболее информативным для выявления возбудителей туберкулёза. Пробы берут несколько раз, как правило, трёх раз достаточно. Это исключает возможность ошибок при получении некачественного материала.

Если человек заражён туберкулёзом, то вместе с кашлем будет выделяться мокрота в небольших количествах. У больных в запущенной стадии заболевания слизь будет выделяться с кровянистыми вкраплениями.

Не рекомендуется брать мокроту для обследования, если у пациента подозрения на туберкулёз костей или нервной системы.

Анализ мочи

Анализ мочи – это один из способов выявления внелёгочных форм заболевания: туберкулёз почек и мочеполовой системы.

При лёгочной форме заболевания общий анализ мочи практически неинформативен, так как не наблюдается ярко выраженных патологических изменений.

Из видео вы узнаете какой врач ставит диагноз туберкулёз. Снято каналом tuberculum. ru.

Подготовка к сдаче анализа

При сдаче анализа крови ПЦР стоит придерживаться некоторых правил для получения достоверного результата:

рекомендуется сдавать анализ натощак;
следует исключить алкоголь накануне обследования;
нужно закончить приём антибиотиков за 15–20 дней до анализа;
рекомендуется воздержаться от курения за час до забора крови.

При сдаче мокроты для обследования также рекомендуется следовать некоторым правилам:

материал собирают утром, поэтому предварительно чистят зубы и тщательно полоскают ротовую полость;
если мокрота плохо отходит, то рекомендуется вечером принять отхаркивающее средство или сделать ингаляцию;
необходимо прекратить приём антибиотиков за 15 дней до обследования.

Для получения достоверного результата анализа мочи, пациенту рекомендуется придерживаться следующих правил:

материал необходимо собирать с утра;
накануне не рекомендуется употреблять в пищу продукты, которые способны изменить цвет жидкости (свёклу, чернику и другие);
прекратить приём антибиотиков за 15 дней до обследования.

Как проводится ПЦР на туберкулёз

Особенности забора материала:

Анализ крови обязательно берётся у пациента утром из вены в лаборатории.
Для сдачи мокроты на слизь нужна обязательно из гортани и желательно без большого количества слюны. Её пациент должен сплюнуть в специальный стерильный контейнер, после чего сдать на исследование.
Врачи берут соскоб специальным инструментом со слизистой щеки.
Моча сдаётся в специальном контейнере. Берётся средняя часть утренней порции.

Молекулярно генетическая реакция посредством ПЦР проводится с помощью специального прибора, который называется амплификатор. Для изучения необходимы сегменты ДНК, с которых начинается синтез молекул.

Методика состоит из четырёх этапов:

Изначально собирается необходимый биоматериал для исследования (кровь, мокрота и слюна).
Затем образец прогревается при температуре до 98 градусов и не более двух минут. Таким образом, разрушается первичная форма генетики ДНК и образуются две цепочки.
Далее идёт отжиг или понижение температуры, за счёт чего праймер связывается с нитью ДНК.
Последний этап носит название элонгация. Это синтез молекул, который приводит к конечному результату.

Необходимо провести 25–30 подобных циклов, чтобы получить определённое количество копий ДНК вирусов. По ним и определяются возбудители заболевания.

Информативность и достоверность ПЦР диагностики составляет 100%.

Расшифровка результатов обследования

Сроки изготовления анализа составляют порядка 5–6 часов.

Диагностика методом ПЦР даёт 2 варианта результатов:

Обнаружено. В материале, который исследовали, были выявлены ДНК туберкулёзного агента. Вероятность заражения составляет 97%. Таких пациентов быстро направляют в противотуберкулёзный диспансер, где и будет проводиться лечение.
Не обнаружено. Отрицательный ответ свидетельствует об отсутствии возбудителя заболевания.

При положительном результате врачом проводится развёрнутая расшифровка, которая определяет стадию и очаг болезни.

Фотогалерея

Анализ мокроты на туберкулёзАнализ крови на туберкулёзАнализ слюны на туберкулёз

Особенности ПЦР на туберкулёз у детей

ПЦР назначают, если сомнителен результат пробы Манту или при малейшем подозрении на заражение. Провежение процедуры безапасно для детей.

Сколько стоит ПЦР на туберкулёз?

Регион	Стоимость	Фирма
Москва	от 365 руб.	«ИНВИТРО»
Челябинск	от 140 руб.	«Областная клиническая больница №3»
Краснодар	от 350 руб.	«Солнечная»